1. 高效液相色谱仪方法设置
在色谱中，峰面积和浓度是成正比的。标准曲线就是一条横轴是浓度，纵轴是峰面积的曲线。
做标准曲线首先你的有标准物质，然后有一个曲线的浓度范围。
比如说，标准物质X，浓度是.1mg/ml-2mg/ml。
配制样品的时候，取X适量，配制成浓度为1mg/ml的母液，然后逐级稀释，配制成浓度为.1mg/ml,.2mg/ml,.5mg/ml,1.mg/ml,2.mg/ml的样品，然后按照浓度由低到高的顺序进样分析。（由低到高是避免系统误差）
注意：这里是配制一份样品，稀释成若干线性用的样品。一般至少5个浓度。
比如结果是：
浓度 峰面积
.1 1
.2 2
.5 49
1. 95
2. 195
然后可以再excel上形成散点图。然后添加趋势线，并且显示R2和公式。这个y=97.4x+.498就是这个线性公式，R2是相关系数。我故意做的偏了一点。这个系数越接近1，你的线性做得就越准。
2. 高效液相色谱仪设置的主要仪器参数
一般Agilent 1200+C18柱斜率设置0.1~3.0间，最小峰面积和峰宽看你的需要来定。
不同的仪器或软件计算方法不同，用的参数也不尽相同；还和你的色谱图的噪音，你需要的效果有关。
峰高×半高峰宽,峰高×平均峰宽,积分都可以.有峰高就可以计算了,m=fA中A可以是峰高或峰面积,m是质量或浓度。比如有时候我们用归一化法，客户允许我们忽略0.3%以下的杂质，那么我们可以把最小峰面积设到主峰的0.3%
3. 高效液相色谱仪设置序列最后能得到什么样的
1 开机
1.1 打开计算机，输入用户名和密码，进入Windows画面。
1.2打开1260 LC 各模块电源(不分先后)。待各模块自检完成后，双击“仪器1联机”图标，化学工作站自动与1260 LC通讯，进入工作站。
1.3从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面，来调用所需的界面，正常情况会默认进入此界面。
2 数据采集方法、系列编辑：
2.1编辑完整方法：
2.1.1 从“方法”菜单中选择“编辑完整方法” 项，选中除“数据分析 ”外的三项，单击“确定”，进入下一界面“方法注释”。
2.1.2 方法信息：
在“方法注释”中写入方法的相关信息。此项可忽略不写，单击“确定”，进入下一界面“选择进样源/位置”。
2.1.3 自动进样器参数设定:
选择“Als”的进样方式，单击“确定”，进入下一界面“设置方法”。
2.1.4 方法参数设定：
在“设置方法”界面选择“四元泵”选项，在“流量”处输入所需流量，如：1ml/min，在溶剂“B”、“C”、“D”处输入流动相所占比例(A=100-B-C-D)，也可在右侧“时间表”项下选择“添加”，编辑梯度。在“停止时间”项下输入样品运行时间，在“压力限值”输入柱子的最大耐高压，如400bar，以保护柱子。
选择“进样器”选项输入进样体积。
选择“TCC” 选项，在左侧输入所需温度或选“不控制“，选中“和左侧相同”---使柱温箱的温度左右一致。
选择“DAD” 选项输入检测波长，一般选择最大吸收处的波长；该仪器能设八个波长。
以上各项编辑完后，单击“确定”，进入下一界面“运行时选项表”。
进入“运行时选项表”选中“数据采集”和“标准数据分析”，单击“确定”。
保存方法：
2.1.5 方法编辑完，在“方法” 菜单中选则“方法另存为”为新建方法命名，单击“确定”。
2.2 数据采集方法：
2.2.1 序列参数编辑：
在“序列”菜单中选择“序列参数”，在弹出对话框中输入操作者名称，数据存储目录路径中的子目录，子目录即为数据图谱存储的文件夹，请认真填写，输入后，鼠标点击其他处，会自动弹出“E:\---不存在，要创建它吗？”单击“确定”，再选择“手动”或“前缀/计数器”。
2.2.2 编辑序列表：
编辑序列表：在“序列”菜单中选择“序列表”，在“序列”菜单中选择“序列模板另存为”，为新建序列命名。
2.2.3 运行序列：
色谱柱安装完成后，在“仪器”菜单中选择“系统开启”或单击界面右侧绿色的“打开”快捷键，平衡色谱柱，等基线平稳，在“仪器”菜单中选择“运行序列”。
3 数据分析方法编辑:
3.1 打开“仪器1脱机”。从“视图”菜单中，单击“数据分析”进入数据分析界面。
3.2 从“文件”菜单选择“调用信号”，选中您的数据文件，单击“确定”。
3.3 做谱图优化，从“图形”菜单中选择“信号选项”选项，根据自身需要选择合适项。
3.4 积分。
3.5 打印报告并保存数据。
4 关机:
4.1 关机前，用95%水冲洗柱子和系统0.5-1小时，流量0.5~1ml/min，再用100%有机溶剂冲0.5小时，然后关泵，（适于反相色谱柱）。[正相色谱柱用适当的溶剂冲洗]
4.2 退出化学工作站，及其它窗口，关闭计算机。
4.3 关闭全部电源，稳压器等。
4. 高效液相色谱仪设置梯度时形状的作用
色谱的波长可以提高溶剂的灵敏度。
溶剂中如果含有吸收紫外光的杂质，同样会使检测背景提高，灵敏度降低，且用作梯度洗脱时会引起严重漂移。
因此，鲁创分析认为液相色谱仪系统对溶剂纯度要求较高，一般应使用分光纯或分析纯溶剂，在有条件时，色谱纯溶剂为首选。应注意不能使用化学纯及纯度更低的溶剂。有时需要对溶剂进行专门纯化处理。
5. 高效液相色谱仪基本操作
高效液相色谱仪操作步骤：
1).过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜。
2).对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。
3).打开HPLC工作站(包括计算机软件和色谱仪)，连接好流动相管道，连接检测系统。
4).进入HPLC控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。
5).有一段时间没用，或者换了新的流动相，需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵，直接在泵的出水口，用针头抽取。冲洗进样阀，需要在manual菜单下，先点击purge，再点击start，冲洗时速度不要超过10ml/min。
6).调节流量，初次使用新的流动相，可以先试一下压力，流速越大，压力越大，一般不要超过2000。点击injure，选用合适的流速，点击on，走基线，观察基线的情况。
7).设计走样方法。点击file，选取selectusersandmethods，可以选取现有的各种走样方法。若需建立一个新的方法，点击newmethod。选取需要的配件，包括进样阀，泵，检测器等，根据需要而不同。选完后，点击protocol。一个完整的走样方法需要包括：a.进样前的稳流，一般2-5分钟;b.基线归零;c.进样阀的loading-inject转换;d.走样时间，随不同的样品而不同。
8).进样和进样后操作。选定走样方法，点击start。进样，所有的样品均需过滤。方法走完后，点击postrun，可记录数据和做标记等。全部样品走完后，再用上面的方法走一段基线，洗掉剩余物。
9).关机时，先关计算机，再关液相色谱。
10).填写登记本，由负责人签字。
6. 高效液相色谱仪使用说明
1、开机设定参数（检测波长、流速），更换所需流动相，检查色谱柱是否正确。
2、排液置换管路中流动相，冲洗进样阀，洗好进样针。
3、冲洗色谱柱进行平衡，其间可提前进行样品的处理，样品信息的注册。
4、平衡好以后进空白试验，排除系统污染。
5、柱子稳定好以后进样，等待运行结束（其间清洗进样针），积分计算，出具报告。
7. 高效液相色谱怎么操作
1、开机设定参数（检测波长、流速），更换所需流动相，检查色谱柱是否正确。
2、排液置换管路中流动相，冲洗进样阀，洗好进样针。
3、冲洗色谱柱进行平衡，其间可提前进行样品的处理，样品信息的注册。
4、平衡好以后进空白试验，排除系统污染。
5、柱子稳定好以后进样，等待运行结束（其间清洗进样针），积分计算，出具报告。
8. 高效液相色谱仪参数设置
1、开机设定参数（检测波长、流速），更换所需流动相，检查色谱柱是否正确。
2、排液置换管路中流动相，冲洗进样阀，洗好进样针。
3、冲洗色谱柱进行平衡，其间可提前进行样品的处理，样品信息的注册。
4、平衡好以后进空白试验，排除系统污染。
5、柱子稳定好以后进样，等待运行结束（其间清洗进样针），积分计算，出具报告。
9. 高效液相色谱仪方法设置在哪里
C18柱子不能用纯水冲洗，再说本来就堵了，压力很高应该选择压力低的溶剂。
如果你确定是堵塞了，就用纯乙腈反冲，先用低一点的流速，比如01ml/min，看压力情况，不要超过200bar，再慢慢提高流速，但不要超过1.的流速，如果是真的堵了，可能会压力慢慢降下来的。
如果上面方法不行，那还有可能是盐析堵的，那就用乙腈：水=90：10反冲。
